Agaroz-gel elektroforezning asosiy usullari(1)

1. Tasniflash

Jel elektroforezi vertikal turlarga (jumladan, ustunli jel va plita jeli) va gorizontal turlarga (asosan plita jeli) bo'linadi (6-18-rasm). Umuman olganda, vertikal ajratish gorizontaldan biroz ustundir, ammo gorizontal jel tayyorlash kamida to'rtta afzalliklarga ega: butun jel ostida qo'llab-quvvatlash mavjud bo'lib, past konsentratsiyali agarozdan foydalanishga imkon beradi; turli spetsifikatsiyadagi agaroz jel plitalarini tayyorlash mumkin; jel tayyorlash va namunani yuklash qulayroq; elektroforez kamerasini qurish oson va tejamkor. Gorizontal elektroforez agaroz gel plastinkasi elektroforez tamponining yuzasidan taxminan 1 mm pastda toʻliq suv ostida boʻlgan holda amalga oshirilganligi sababli, u suv osti elektroforez deb ham ataladi.

mín 2

Agaroz gel elektroforezi uchun DYCP-31DN elektroforez tanki

2.Bufer tizimi

Nuklein kislotalarni ajratishda ko'pchilik tizimlar uzluksiz tizimlarni qabul qiladi. Tez-tez ishlatiladigan elektroforez tamponlari orasida TBE (0,08mol/L Tris·HCl, pH 8,5, 0,08mol/L borik kislota, 0,0024mol/L EDTA) buferi va THE (0,04mol/L Tris·HCl, pH 7,8, 0,02mol/L) mavjud. natriy asetat, 0,0018mol/L EDTA) tampon. Ushbu tamponlar odatda 10x eritma eritmasi sifatida tayyorlanadi va foydalanilganda kerakli konsentratsiyaga suyultiriladi. Agaroz jelidagi chiziqli va dumaloq DNKning migratsiya tezligi ishlatiladigan buferga qarab o'zgaradi. THE buferda chiziqli DNKning migratsiya tezligi dumaloq DNKnikiga qaraganda kattaroq, TBE buferida esa aksincha.

3

3.Agaroza gelini tayyorlash

(1) Gorizontal Agaroza Gelini tayyorlash

(a) 1x elektroforez buferi yordamida agaroz jelining kerakli konsentratsiyasini tayyorlang.

(b) Agarozni qaynab turgan suv hammomida, magnit aralashtirgichda yoki mikroto'lqinli pechda to'liq eritish uchun qizdiring. Agaroz eritmasini 55°C ga sovutib, etidiy bromid (EB) bo‘yog‘ini 0,5 mkg/ml yakuniy konsentratsiyaga qo‘shing.

(c) Shisha yoki akril plitalarning chetlarini oz miqdorda agaroz jeli bilan yoping, taroq qo'shing va taroq tishlarini plastinkadan taxminan 0,5 ~ 1,0 mm balandlikda joylashtiring.

(d) Eritilgan agaroz jeli eritmasini doimiy ravishda shisha yoki akril plastinka qolipiga quying (qalinligi DNK namunasi hajmiga bog'liq), havo pufakchalari kiritilishiga yo'l qo'ymaslik. Xona haroratida tabiiy ravishda qotib qolsin.

(e) To'liq qotib qolgandan keyin taroqni ehtiyotkorlik bilan olib tashlang. Jel idishiga tegishli miqdorda elektroforez buferini qo'shing, jel plitasi elektroforez tamponining yuzasidan taxminan 1 mm pastroqda bo'lishini ta'minlang.

(2) Vertikal agaroz jelini tayyorlash

(a) Etanol bilan yuvish orqali shisha plitalardan yog 'yoki qoldiqlarni olib tashlang.

(b) old va orqa to'g'onlar orasiga ajratuvchi plitalarni joylashtiring, ajratuvchi plitalarning chetlarini old va orqa to'g'onlarga to'g'rilang va ularni qisqichlar bilan mahkamlang.

(c) Jel ​​quyish kamerasining pastki qismida 1 sm balandlikdagi agaroz vilkasini hosil qilish uchun ajratuvchi plitalarning chetlari orasiga 1x buferga 2% agaroza qo'shing.

(d) 1x tamponda tayyorlangan, kerakli konsentratsiyada eritilgan agaroz jelini yuqoridan 1 sm pastgacha bo'lgan jel kamerasiga quying.

(e) Taroq tishlari ostidagi havo pufakchalarini ushlab turmaslik uchun taroqni joylashtiring. Ba'zida agaroz jelini sovutish paytida taroq tishlarida ajinlar paydo bo'lishi mumkin; Bunday hollarda, uni qotib qolish uchun tepaga bir oz eritilgan agaroz qo'shing.

(f) taroqni olib tashlang. Yuklash joyida bufer oqishi oldini olish uchun agaroz jel plastinkasi va elektroforez kamerasi o'rtasidagi aloqani 2% agaroza bilan yoping va kerakli miqdorda bufer qo'shing.

(g) Jel ​​kamerasiga 1x elektroforez buferi qo'shing.

(h) Ehtiyotkorlik bilan DNK namunalarini bufer ostidagi agaroz jelga yuklang.

3

Agaroz gel elektroforezi haqidagi asosiy bilimlar haqida ko'proq ma'lumotni kelgusi haftada baham ko'ramiz. Ushbu ma'lumotlar tajribangiz uchun foydali bo'lishini tilayman.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) o'z professional texnik jamoasi va Ar-ge markazi bilan 50 yildan ortiq elektroforez asboblarini ishlab chiqarishga ixtisoslashgan. Bizda dizayndan tortib to tekshirishgacha bo'lgan ishonchli va to'liq ishlab chiqarish liniyasi, omborxona, shuningdek marketing yordami mavjud. Bizning asosiy mahsulotlarimiz elektroforez xujayrasi (tank / kamera), elektroforez quvvat manbai, ko'k LED transilluminator, UV transilluminator, jel tasvir va tahlil tizimi va boshqalar.

Endi biz hamkorlarni qidirmoqdamiz, ham OEM elektroforez tanki, ham distribyutorlar mamnuniyat bilan qabul qilinadi.

Mahsulotlarimizni xarid qilish rejangiz bo'lsa, iltimos biz bilan bog'lanishdan tortinmang. Bizga elektron pochta orqali xabar yuborishingiz mumkin[elektron pochta himoyalangan]yoki[elektron pochta himoyalangan], yoki bizga +86 15810650221 raqamiga qo'ng'iroq qiling yoki Whatsapp +86 15810650221 yoki Wechat: 15810650221 raqamini qo'shing.

Whatsapp yoki WeChat-ga qo'shish uchun QR kodini skanerlang.

2


Xat vaqti: 2023-yil 07-dekabr