Jel elektroforezini optimallashtirish: namuna hajmi, kuchlanish va vaqtni belgilash uchun eng yaxshi amaliyotlar

Kirish

Jel elektroforezi molekulyar biologiyaning asosiy usuli bo'lib, oqsillarni, nuklein kislotalarni va boshqa makromolekulalarni ajratish uchun keng qo'llaniladi. Namuna hajmini, kuchlanishni va elektroforez vaqtini to'g'ri nazorat qilish aniq va takrorlanadigan natijalarga erishish uchun juda muhimdir.Laboratoriyadagi hamkasbimiz taklif qiladiSDS-PAGE gel elektroforezi paytida ushbu parametrlarni boshqarish bo'yicha eng yaxshi amaliyotlar.

3

Pekin Liuyi Biotexnologiya gel elektroforez mahsulotlari

Namuna hajmi: izchillikni ta'minlash

SDS-PAGE elektroforezini amalga oshirayotganda, namuna hajmi sizning natijalaringizning aniqligiga sezilarli ta'sir ko'rsatadigan asosiy omil hisoblanadi. Odatda har bir quduqqa 10 mkL umumiy protein yuklash tavsiya etiladi. Konsistensiyani ta'minlash va qo'shni quduqlar o'rtasida namuna tarqalishining oldini olish uchun har qanday bo'sh quduqlarga teng hajmdagi 1x yuklash buferini yuklash muhimdir. Ushbu ehtiyot chorasi quduq bo'sh qolsa paydo bo'lishi mumkin bo'lgan qo'shni bo'laklarga namunalarning tarqalishini oldini olishga yordam beradi.

Namunalaringizni yuklashdan oldin, har doim bitta quduqqa molekulyar og'irlik belgisini qo'shish bilan boshlang. Bu elektroforezdan keyin oqsil o'lchamlarini osongina aniqlash imkonini beradi.

1

Kuchlanishni nazorat qilish: tezlik va ruxsatni muvozanatlash

Elektroforez paytida qo'llaniladigan kuchlanish to'g'ridan-to'g'ri namunalarning jel orqali o'tish tezligiga ham, ajratishning o'lchamlariga ham ta'sir qiladi. SDS-PAGE uchun 80V atrofida past kuchlanishdan boshlash tavsiya etiladi. Bu dastlabki past kuchlanish namunalarni asta-sekin va bir tekisda ko'chib o'tishga imkon beradi, ular ajratuvchi jelga kirganda ularni o'tkir chiziqqa jamlaydi.

Namunalar ajratuvchi jelga to'liq kirgandan so'ng, kuchlanish 120 V ga oshirilishi mumkin. Bu yuqori kuchlanish migratsiyani tezlashtiradi va oqsillarni molekulyar og'irligiga qarab samarali ravishda ajratishni ta'minlaydi. Elektroforezning tugallanganligini ko'rsatadigan bromofenol ko'k bo'yoq jabhasining rivojlanishini kuzatish juda muhimdir. 10-12% konsentratsiyali jellar uchun odatda 80-90 daqiqa etarli; ammo 15% jellar uchun ishlash vaqtini biroz uzaytirishingiz kerak bo'lishi mumkin.

Vaqtni boshqarish: qachon to'xtashni bilish

Vaqt - jel elektroforezidagi yana bir muhim omil. Jelni juda uzoq yoki juda qisqa muddat davomida ishlatish suboptimal ajralishga olib kelishi mumkin. Bromofenol ko'k bo'yoqning migratsiyasi foydali ko'rsatkichdir: u jelning pastki qismiga etib kelganida, odatda yugurishni to'xtatish vaqti keladi. Standart jellar uchun, masalan, 10-12%, taxminan 80-90 daqiqa elektroforez davomiyligi odatda etarli. Yuqori foizli jellar uchun, masalan, 15%, oqsillarni to'liq ajratishni ta'minlash uchun ishlash muddati uzaytirilishi kerak.

Buferni boshqarish: buferlarni qayta ishlatish va tayyorlash

Laboratoriyangizning o'ziga xos sharoitlariga qarab, elektroforez buferi 1-2 marta qayta ishlatilishi mumkin. Biroq, optimal natijaga erishish uchun yangi 10x tampon tayyorlash va uni ishlatishdan oldin suyultirish tavsiya etiladi. Bu buferning samaradorligini saqlab qolishini ta'minlaydi, bu esa yanada ishonchli elektroforez natijalariga olib keladi.

2

Pekin Liuyi Biotexnologiya gel elektroforez mahsulotlari

Namuna hajmini, kuchlanishni va elektroforez vaqtini diqqat bilan nazorat qilish orqali siz jel elektroforez natijalarining aniqligi va takrorlanishini sezilarli darajada yaxshilashingiz mumkin. Laboratoriya ishingizda ushbu eng yaxshi amaliyotlarni qo'llash sizga aniqroq va aniqroq diapazonlarga erishishga yordam beradi, bu esa quyi oqim tahlili uchun yaxshiroq ma'lumotlarga olib keladi.

Agar sizda jel elektroforezi tajribasini optimallashtirish uchun ko'proq yaxshi usullar mavjud bo'lsa, biz bilan muhokama qilishga xush kelibsiz!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) o'z professional texnik jamoasi va Ar-ge markazi bilan 50 yildan ortiq elektroforez asboblarini ishlab chiqarishga ixtisoslashgan. Bizda dizayndan tortib to tekshirishgacha bo'lgan ishonchli va to'liq ishlab chiqarish liniyasi, omborxona, shuningdek marketing yordami mavjud. Bizning asosiy mahsulotlarimiz elektroforez xujayrasi (tank / kamera), elektroforez quvvat manbai, ko'k LED transilluminator, UV transilluminator, jel tasvir va tahlil tizimi va boshqalar. Shuningdek, biz laboratoriya uchun PCR asbobi, vorteks mikser va sentrifuga kabi laboratoriya asboblarini yetkazib beramiz.

Mahsulotlarimizni xarid qilish rejangiz bo'lsa, iltimos biz bilan bog'lanishdan tortinmang. Bizga elektron pochta orqali xabar yuborishingiz mumkin[elektron pochta himoyalangan]yoki[elektron pochta himoyalangan], yoki bizga +86 15810650221 raqamiga qo'ng'iroq qiling yoki Whatsapp +86 15810650221 yoki Wechat: 15810650221 raqamini qo'shing.

Whatsapp yoki WeChat-ga qo'shish uchun QR kodini skanerlang.

2


Yuborilgan vaqt: 20-avgust-2024-yil