Kometa tahlili (Yagona hujayrali gel elektroforezi, SCGE) sezgir va tezkor usul bo'lib, asosan alohida hujayralardagi DNK shikastlanishini va tiklanishini aniqlash uchun ishlatiladi. "Kometa tahlili" nomi natijalarda paydo bo'ladigan xarakterli kometa shaklidan kelib chiqadi: hujayra yadrosi "bosh" ni hosil qiladi, shikastlangan DNK bo'laklari esa ko'chib, kometaga o'xshash "dum" hosil qiladi.
Prinsip
Kometa tahlilining printsipi DNK parchalarining elektr maydonida migratsiyasiga asoslangan. Buzilmagan DNK hujayra yadrosida qoladi, shikastlangan yoki parchalangan DNK esa anod tomon o'tib, kometaning "dumini" hosil qiladi. Quyruqning uzunligi va intensivligi DNKning shikastlanish darajasiga to'g'ridan-to'g'ri proportsionaldir.
Jarayon
- Hujayra tayyorlash: Tekshiriladigan hujayralar past erish nuqtasi bo'lgan agaroza bilan aralashtiriladi va bir xil qatlam hosil qilish uchun mikroskop slaydlariga yoyiladi.
- Hujayra lizisi: Slaydlar hujayra membranasini va yadro membranasini olib tashlash uchun lizis eritmasiga botiriladi, DNKni fosh qiladi.
- Elektroforez: Slaydlar ishqoriy yoki neytral sharoitda elektroforez kamerasiga joylashtiriladi. Zararlangan DNK fragmentlari elektr maydoni ta'sirida musbat elektrod tomon ko'chib o'tadi.
- Bo'yash: Elektroforezdan so'ng slaydlar DNKni ko'rish uchun floresan bo'yoq (masalan, etidiy bromid) bilan bo'yaladi.
- Mikroskopik tahlil: Floresan mikroskop yoki maxsus dastur yordamida kometa shakllari tahlil qilinadi va quyruq uzunligi va intensivligi kabi parametrlar o'lchanadi.
Biorenderdan rasm
Ma'lumotlarni tahlil qilish
Kometa tahlili natijalari bir nechta asosiy parametrlar asosida baholanadi:
- Quyruq uzunligi: DNKning ko'chish masofasini ifodalaydi, bu DNKning shikastlanish darajasini ko'rsatadi.
- Quyruq DNK tarkibi: Ko'pincha DNK shikastlanishining miqdoriy o'lchovi sifatida ishlatiladigan dumga o'tadigan DNK foizi.
- Zaytun quyruq momenti (OTM): DNK shikastlanishining kengroq o'lchovini ta'minlash uchun quyruq uzunligi va quyruq DNK tarkibini birlashtiradi.
Ilovalar
- Genotoksisite tadqiqotlari: Kometa tahlili kimyoviy moddalar, dorilar va radiatsiyaning hujayra DNKsiga ta'sirini baholash uchun keng qo'llaniladi, bu uni genotoksisite testi uchun asosiy vositaga aylantiradi.
- Atrof-muhit toksikologiyasi: U atrof-muhitni ifloslantiruvchi moddalarning organizmlar DNKsiga ta'sirini tahlil qilishda yordam beradi, ekotizim xavfsizligi haqida tushuncha beradi.
- Tibbiy va klinik tadqiqotlar: Kometa tahlili DNKni tiklash mexanizmlari, saraton va boshqa DNK bilan bog'liq kasalliklarni o'rganishda qo'llaniladi. Shuningdek, u radiatsiya va kimyoterapiya kabi saratonni davolash usullarining DNKga ta'sirini baholaydi.
- Oziq-ovqat va qishloq xo'jaligi fanlari: Pestitsidlar, oziq-ovqat qo'shimchalari va boshqa moddalar xavfsizligini baholash va hayvonlar modellarida ularning toksik ta'sirini o'rganish uchun ishlatiladi.
Afzalliklar
- Yuqori sezuvchanlik: DNK shikastlanishining past darajasini aniqlashga qodir.
- Oddiy operatsiya: Texnika oddiy bo'lib, uni yuqori o'tkazuvchanlik skrining uchun mos qiladi.
- Keng dastur: Turli xil hujayralar, jumladan, hayvon va o'simlik hujayralariga qo'llanilishi mumkin.
- Miqdorni aniqlash muammolari: DNK shikastlanishi bo'yicha sifatli ma'lumotlarni taqdim etar ekan, miqdoriy tahlil asosan dasturiy ta'minot va tasvirni tahlil qilish usullariga tayanadi.
- Eksperimental sharoitlar: Natijalarga elektroforez vaqti va pH kabi omillar ta'sir qilishi mumkin, bu esa tajriba sharoitlarini diqqat bilan nazorat qilishni talab qiladi.
Cheklovlar
Kometa tahlili DNKning shikastlanishini aniqlash va tiklashda moslashuvchanligi va yuqori sezgirligi tufayli biotibbiyot tadqiqotlari, atrof-muhit fanlari va dori vositalarini ishlab chiqishda bebaho vositadir. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)kometa tahlili uchun gorizontal elektroforez kamerasini taklif qiladi. Haqida muhokama qilish uchun biz bilan bog'lanishga xush kelibsizKometa tahliliprotokol.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) o'z professional texnik jamoasi va Ar-ge markazi bilan 50 yildan ortiq elektroforez asboblarini ishlab chiqarishga ixtisoslashgan. Bizda dizayndan tortib to tekshirishgacha bo'lgan ishonchli va to'liq ishlab chiqarish liniyasi, omborxona, shuningdek marketing yordami mavjud. Bizning asosiy mahsulotlarimiz elektroforez xujayrasi (tank / kamera), elektroforez quvvat manbai, ko'k LED transilluminator, UV transilluminator, jel tasvir va tahlil tizimi va boshqalar. Shuningdek, biz laboratoriya uchun PCR asbobi, vorteks mikser va sentrifuga kabi laboratoriya asboblarini yetkazib beramiz.
Mahsulotlarimizni xarid qilish rejangiz bo'lsa, iltimos biz bilan bog'lanishdan tortinmang. Bizga elektron pochta orqali xabar yuborishingiz mumkin[elektron pochta himoyalangan]yoki[elektron pochta himoyalangan], yoki bizga +86 15810650221 raqamiga qo'ng'iroq qiling yoki Whatsapp +86 15810650221 yoki Wechat: 15810650221 raqamini qo'shing.
Whatsapp yoki WeChat-ga qo'shish uchun QR kodini skanerlang.
Yuborilgan vaqt: 20-sentabr-2024