Prinsip
Tsellyuloza asetat plyonkasi elektroforezi tsellyuloza asetat plyonkasini tayanch sifatida ishlatadigan elektroforez usulidir.Elektr maydoni ta'sirida zaryadlangan zarrachalarning qarama-qarshi elektrod tomon harakatlanishi hodisasi elektroforez deb ataladi.Har bir oqsilning o'ziga xos izoelektrik nuqtasi bo'lganligi sababli, agar oqsil o'zining izoelektrik nuqtasidan pH darajasi past bo'lgan eritma ichiga joylashtirilsa, oqsil musbat zaryadlanadi va manfiy elektrod tomon harakatlanadi.Aksincha, u ijobiy qutbga o'tadi.Elektr maydonida harakatlanuvchi oqsil molekulalarining tezligi ularning zaryadiga, molekulalarning shakli va hajmiga bog'liq bo'lganligi sababli, elektroforez orqali turli oqsillarni ajratish mumkin.Sarum turli xil oqsillarni o'z ichiga oladi, ularning barchasi pH 7,5 yoki undan pastda izoelektrik nuqtalarga ega.Elektroforezni o'tkazish uchun zardob pH 8,6 buferiga qo'yilsa, barcha zardob oqsillari manfiy zaryadlanadi va elektr maydonida ijobiy tomonga qarab harakatlanadi.Turli xil zardob oqsillari bir xil pH da turli zaryadga ega bo'lganligi sababli, molekulyar zarralar hajmi jihatidan farq qiladi va shuning uchun migratsiya tezligi har xil bo'ladi va ular elektroforez bilan ajralib turadi.Sarum oqsillarining izoelektrik nuqtalari va molekulyar og'irliklari quyidagi jadvalda ko'rsatilgan:
| Protein | Izoelektrik nuqtalar (PI) | Molekulyar og'irlik |
| Albumin | 4.88 | 69 000 |
| a1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
| a2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
| b-gloulin | 5.12 | 9 000 ~ 150 000 |
| g-gloulin | 6,85 ~ 7,50 | 156 000 ~ 300 000 |
Tajriba qon zardobidagi turli oqsillarni qo'llab-quvvatlovchi vosita sifatida tsellyuloza asetat membranasi (qisqa. CAM) bilan ajratishdan iborat.CAM ko'pikli loosning bir turieplyonka yaxshi formaga ega va qalinligi 0,1 mm-1,5 mm bo'lib, ma'lum bir suv singishiga ega.
CAM elektroforezi uchun materiallar, asboblar va reagentlar
Namunalar:sog'lom inson qon zardobi
Asbob:quvvat manbai DYY-6C, elektroforez tanki DYCP-38C, yuqori namuna yuklash WD-9404
Reaktivlar
1) tsellyuloza asetat membranasi 7X9 sm
2) PH 8,6 barbitol bufer eritmasi (ion kuchi 0,05-0,09, u 0,06 tid vaqt): 1,84 g Dietilbarbiturik kislota oling, so'ngra 1,03 g Dietil natriy pentobarbital oling, eritish uchun qizdirish uchun bir oz distillangan suv qo'shing va hosil qiling. 1000 ml gacha;
3) dog ': Ponceau S 0,2 g, Trichloroacetic 3g, 100 ml distillangan suv qo'shing;
4) TBS/T yoki PBS/T: 45ml 95% etanol, 5ml muz sirka kislotasi, 50ml distillangan suv qo'shing;
5) Tozalash eritmasi: 70 ml suvsiz etanol, 30 ml muzli sirka kislotasi.
Tajriba usulid
1) Membranani tayyorlang: membranani barbitol bufer eritmasiga 30-8 soat davomida botiring va uni chiqarib oling, qo'shimcha eritmani changni yutish qog'oz bilan olib tashlang.
2) Namunalarni yuklash: Membrananing qo'pol tomoni va silliq tomonini ajratib oling va qo'pol tomondan yuqori uchiga 1,5 sm masofada chiziqni belgilang.Namunalarni qo'pol tomondan yuqori namuna yuklash vositasi bilan yuklang.Eslatma: Namunalar membrananing qo'pol tomoniga yuklanishi kerak.Sarum namunalari membranaga to'liq kirib bo'lgandan so'ng, membranani ag'daring, dag'al tomonini (namunalar bilan) pastga qaratib, tankga qo'ying va namunalar bilan uchi salbiy elektrodga joylashtiriladi.
3) Elektroforez: Elektr ta'minotini yoqing, 0,4～0,6m A/sm membrana, ishlash muddati 30-45 min.Elektroforezni ishga tushirgandan so'ng, quvvatni o'chiring.
4) Bo'yash va tozalash: Membranani idishdan chiqarib oling va suvga botiringit 5 daqiqa davomida bo'yoq eritmasiga soling, so'ngra uni tozalash eritmasida fon rangi aniq bo'lguncha 3-4 marta qayta-qayta tozalang.Sarum oqsillari bantlarda ko'rsatilishi kerak va odatda beshta zona mavjud bo'lib, ular belgilangan chiziqning yuqori uchini tashkil qiladi, Albumin, a1-gloulin, a2-gloulin, b-gloulin, g-gloulin.
5) Saqlash: quruq elektroforez qo'yingbandtozalovchi eritmada 10-15 daqiqa ushlab turing, so'ng uni olib tashlang va toza oynaga yopishtiring, quriganidan keyin shaffof plyonkaga aylanadi.band.
TajribaNatija
Sarum namunalarini ajratish effekti yaxshi va tarmoqli qoldiq hodisasi yo'q.Natijalarning takrorlanishi sinov protseduralari va eksperimentatorning usullariga qarab o'zgarib turadi va takroriylik yuqori.
Xulosa
Tez klinik elektroforezni aniqlash tizimi (Elektroforez tankiDYCP-38C,quvvatlantirish manbaiDYY-6C va yuqori namunali yuklash WD-9404) biz tomonidan ishlab chiqarilgankompaniyasi Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdeksperimental talablarga javob beradi,vanatijalar takrorlanishi mumkin, oddiy va tez, mos keladita'lim berishtadqiqot.
Pekin LiuyiBiotechnology Co., Ltd hayot fanlari sanoati uchun elektroforez mahsulotlarini ishlab chiqarishga ixtisoslashgan.Xitoyda 50 yildan ortiq tarixga ega va kompaniya butun dunyo bo'ylab barqaror va yuqori sifatli mahsulotlarni taqdim eta oladi.Ko'p yillik rivojlanish orqali u sizning tanlovingizga loyiqdir!
Endi biz hamkorlarni qidirmoqdamiz, ham OEM elektroforez tanki, ham distribyutorlar mamnuniyat bilan qabul qilinadi.
Biz haqimizda qo'shimcha ma'lumot olish uchun elektron pochta orqali biz bilan bog'laning[elektron pochta himoyalangan]yoki[elektron pochta himoyalangan].
Yuborilgan vaqt: 2022 yil 14-noyabr