Biz o'tgan hafta tsellyuloza asetat membran elektroforezini qo'llash bo'yicha bir nechta fikrlarni o'rtoqlashdik va biz ushbu mavzuni bugun ma'lumot uchun bu erda tugatamiz.
ni tanlash Bufer konsentratsiyasi
Tsellyuloza asetat membranasi elektroforezida ishlatiladigan bufer kontsentratsiyasi odatda qog'oz elektroforezida qo'llaniladiganidan pastroqdir.Odatda ishlatiladigan pH 8,6Barbital bufer odatda 0,05 mol / L dan 0,09 mol / L oralig'ida tanlanadi.Konsentratsiyani tanlashda dastlabki aniqlash amalga oshiriladi.Misol uchun, elektroforez kamerasidagi elektrodlar orasidagi membrana chizig'ining uzunligi 8-10 sm bo'lsa, membrana uzunligi santimetriga 25 V kuchlanish talab qilinadi va oqim intensivligi membrana kengligining santimetriga 0,4-0,5 mA bo'lishi kerak.Agar elektroforez paytida bu qiymatlarga erishilmasa yoki oshib ketmasa, bufer konsentratsiyasini oshirish yoki suyultirish kerak.
Haddan tashqari past bufer kontsentratsiyasi bantlarning tez harakatlanishiga va tarmoqli kengligining oshishiga olib keladi.Boshqa tomondan, buferning haddan tashqari yuqori kontsentratsiyasi tarmoqli migratsiyasini sekinlashtiradi, bu esa ma'lum ajratish chiziqlarini ajratishni qiyinlashtiradi.
Shuni ta'kidlash kerakki, tsellyuloza asetat membranasi elektroforezida oqimning muhim qismi namuna orqali o'tkaziladi, bu esa katta miqdorda issiqlik hosil qiladi.Ba'zan tanlangan bufer kontsentratsiyasi mos deb hisoblanishi mumkin.Biroq, atrof-muhit haroratining ko'tarilishi sharoitida yoki yuqori kuchlanishdan foydalanilganda, issiqlik tufayli suvning bug'lanishi kuchayib, bufer kontsentratsiyasining haddan tashqari yuqori bo'lishiga va hatto membrananing qurishiga olib kelishi mumkin.
Namuna hajmi
Tsellyuloza asetat membranasi elektroforezida namuna hajmining miqdori turli omillar, jumladan elektroforez sharoitlari, namunaning o'zi xususiyatlari, bo'yash usullari va aniqlash usullari bilan belgilanadi.Umumiy printsip sifatida, aniqlash usuli qanchalik sezgir bo'lsa, namuna hajmi shunchalik kichik bo'lishi mumkin, bu ajratish uchun foydalidir.Namuna hajmi haddan tashqari ko'p bo'lsa, elektroforetik ajratish naqshlari aniq bo'lmasligi mumkin va binoni ham ko'p vaqt talab qilishi mumkin.Biroq, ajratilgan bo'yalgan bantlarni elyusiya kolorimetrik aniqlash usullari yordamida miqdoriy tahlil qilganda, namuna hajmi juda kichik bo'lmasligi kerak, chunki bu ma'lum komponentlar uchun absorbsiya qiymatlarining past bo'lishiga olib kelishi mumkin, bu ularning tarkibini hisoblashda katta xatolarga olib keladi.Bunday hollarda namuna hajmini mos ravishda oshirish kerak.
Odatda, namunani qo'llash liniyasining har bir santimetriga qo'shilgan namuna hajmi 0,1 dan 5 mkL gacha, 5 dan 1000 mkg gacha bo'lgan namuna miqdoriga teng.Masalan, zardob oqsili elektroforezini muntazam tahlil qilishda, qo'llash liniyasining har bir santimetriga qo'shilgan namuna hajmi odatda 1 mkL dan oshmaydi, bu 60-80 mkg proteinga teng.Shu bilan birga, lipoproteinlar yoki glikoproteinlarni bir xil elektroforez usuli yordamida tahlil qilganda, namuna hajmini mos ravishda oshirish kerak.
Xulosa qilib aytadigan bo'lsak, eng mos namuna hajmi bir qator dastlabki tajribalar orqali muayyan shartlar asosida tanlanishi kerak.
Bo'yash eritmasini tanlash
Tsellyuloza asetat membranasi elektroforezidagi ajratilgan bantlar odatda aniqlashdan oldin bo'yaladi.Turli xil namuna komponentlari turli xil bo'yash usullarini talab qiladi va tsellyuloza asetat membranasi elektroforezi uchun mos bo'lgan bo'yash usullari filtr qog'oziga to'liq mos kelmasligi mumkin.
Bo'yash eritmasini tanlashning uchta asosiy printsipi mavjudtsellyuloza asetat membranasi.Birinchidan,Membrananing qisqarishi va ikkinchisining bo'yash eritmasidan kelib chiqadigan deformatsiyaning oldini olish uchun spirtda eriydigan bo'yoqlardan suvda eriydigan bo'yoqlarga ustunlik berish kerak.Bo'yashdan keyin membranani suv bilan yuvish va binoni davomiyligini minimallashtirish muhimdir.Aks holda, membrana burishishi yoki qisqarishi mumkin, bu esa keyingi aniqlashga ta'sir qiladi.
Ikkinchidan, namuna uchun kuchli bo'yashga yaqin bo'lgan bo'yoqlarni tanlash afzaldir.Sarum oqsillarining tsellyuloza asetat membranasi elektroforezida amino qora 10B odatda sarum oqsili tarkibiy qismlariga kuchli bo'yash yaqinligi va barqarorligi tufayli ishlatiladi.
Uchinchidan, ishonchli sifatli bo'yoqlarni tanlash kerak.Ba'zi bo'yoqlar, xuddi shu nomga ega bo'lishiga qaramay, binonidan keyin ayniqsa qorong'i fonga olib keladigan aralashmalarni o'z ichiga olishi mumkin.Bu hatto dastlab yaxshi ajratilgan bantlarni xiralashtirishi mumkin, bu ularni farqlashni qiyinlashtiradi.
Nihoyat, binoni eritmasi konsentratsiyasini tanlash muhimdir.Nazariy jihatdan, bo'yash eritmasining yuqori konsentratsiyasi namuna komponentlarini yanada chuqurroq bo'yashga va yaxshi bo'yash natijalariga olib kelishi mumkin.Biroq, bunday emas.Namuna komponentlari va bo'yoq o'rtasidagi bog'lanish yaqinligi ma'lum bir chegaraga ega, bu binoni eritmasi konsentratsiyasining oshishi bilan oshmaydi.Aksincha, bo'yash eritmasining haddan tashqari yuqori konsentratsiyasi nafaqat bo'yoqni yo'qotadi, balki aniq fonga erishishni qiyinlashtiradi.Bundan tashqari, rang intensivligi ma'lum bir maksimal qiymatga yetganda, bo'yoqning absorbsiya egri chizig'i, ayniqsa miqdoriy o'lchovlarda chiziqli munosabatlarga rioya qilmaydi.Tsellyuloza asetat membranasi elektroforezida, binoni eritmasi konsentratsiyasi odatda qog'oz elektroforezda qo'llaniladiganidan past bo'ladi.
Pekin Liuyi Biotexnologiyasi haqida bilish uchun tafsilotlar's tsellyuloza asetat membranasielektroforez tanki va uning elektroforez qo'llanilishi uchun bu yerga tashrif buyuring:
lTsellyuloza asetat membranasi bilan zardob oqsilini ajratish uchun tajriba
lTsellyuloza asetat membranasi elektroforezi
Mahsulotlarimizni xarid qilish rejangiz bo'lsa, iltimos biz bilan bog'lanishdan tortinmang.Siz bizga elektron pochta orqali xabar yuborishingiz mumkin[elektron pochta himoyalangan]yoki[elektron pochta himoyalangan], yoki bizga +86 15810650221 raqamiga qo'ng'iroq qiling yoki Whatsapp +86 15810650221 yoki Wechat: 15810650221 raqamini qo'shing.
Malumot:Janob Li tomonidan elektroforez (Ikkinchi nashr).
Xabar berish vaqti: 2023 yil 06-iyun